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为什么需要在Wb实验中使用内部参考抗体?

2019-02-14 03:28365bet体育在线直播

为了确认基因表达产物是正确的,适合儿童鞋的方法是Western Blot。
主要原因是WB的操作相对简单,方便,定性,以及感兴趣的蛋白质量的相对变化。
虽然良好的蛋白质印迹时间可以很容易地,它可能看起来好不尴尬 - 它不能这样做,这是它的假阳性和更多频段的结果。questionIT……毕竟,作为活性生物大分子,抗体和抗原之间的反应后作为1 + 1不是很清楚,未知表达产物的未知产物主要是未知不是真的,有一些焦虑。
因此,严格的实验性蛋白质印迹设计需要优异的参考系统。这对于实验结果的分析非常有用。
特别是当实验出现问题时,很容易发现使用参考系统而不会伤到头部。
优秀的参考系统通常包含分子量标记(用于确定对应于蛋白质条带的分子量),空白载体对照(其中诱导型表达系统还需要具有预诱导控制),已知量标准产品的标准控制;内部参考。
然而,由于经济上的限制和懒惰,很多中国人都提到WesternBlot,因此无法分析问题。即使有结果,也可能影响结果的分析。
内部引用通常是被忽视的元素。
我们知道应该使用蛋白质印迹来比较靶蛋白在不同条件下或不同组织中的相对表达。前提条件是加载相同数量的单元格并获得比较基础。
如果特殊表达量不大,样品量的差异可能会影响结果分析。
那么,你需要内部参考吗?
内部引用是内部引用(InternalControl)。关于哺乳动物细胞的表达,它是指通常由管家基因(管家蛋白)表达的蛋白质。当检测到的蛋白质的表达水平改变时,其在每个组织和细胞中的表达是相对恒定的,这通常用作参考。
除了诸如蛋白质提取,蛋白质定量,等量蛋白质加载,膜转录,靶蛋白质的抗体孵育,显色等过程之外,Western印迹实验还需要检测。使用内部参考来量化蛋白质并补偿负荷过程中的实验误差以保证实验结果的准确性|文献信息| J-GLOBAL科技综合链接中心
内标抗体(InternalControlAntibody)是一种内标蛋白质测试,用于纠正蛋白质定量过程中的实验误差,并验证胶片转录和显色步骤是否正常。
常用的内部参数包括GAPDH,-actin和?有。
- Tubulin。线粒体的内部参考?
?COXIV和核参考?
Hisutona?
H3和?
从Abbkine进口的内部参考抗体产品如PCNA有现货。